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PA MoxiBeads蛋白A琼脂糖磁珠

PROTEIN A MAGNETIC AGAROSE BEADS

PA MoxiBeads®
蛋白A琼脂糖磁珠

用于单克隆抗体及Fc融合蛋白的捕获与纯化。以多孔超顺磁性琼脂糖凝胶微球为基质,偶联经基因工程改造的耐碱型重组蛋白A,适用于细胞培养上清、血清、腹水等复杂样品,支持抗体高通量筛选和不同规模的纯化。

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产品特点

超顺磁琼脂糖基质 以多孔超顺磁性琼脂糖凝胶微球为基质,可直接处理未经澄清的样品,将样品前处理与目标抗体捕获相结合,减少澄清步骤及其可能带来的样品损失。

耐碱型重组配基 采用经基因工程改造的耐碱型重组蛋白A,可耐受0.1–0.5 M NaOH在位清洗,帮助去除宿主细胞蛋白、DNA及其他污染物;对人IgG的结合能力≥60 mg/mL纯磁珠。

适配不同处理规模 F级粒径(10–40 μm)适用于小规模纯化;M级粒径(30–80 μm)磁响应更快,适用于不同规模的移液模式和磁棒模式纯化,可配合磁力架、自动化设备及更大规模的磁分离器使用。

技术参数

产品名称(Product name) PA MoxiBeads F PA MoxiBeads M
产品编号(Product code) MX0102F MX0102M
基质(Matrix) 超顺磁性琼脂糖凝胶微球
配基(Ligand) 耐碱型重组蛋白A,源自大肠杆菌(E. coli),≥10 mg/mL
粒径范围(Particle size)a 10–40 μm 30–80 μm
结合能力(Binding capacity)b ≥60 mg h-IgG/mL纯磁珠
pH稳定性(pH stability, operational) 3–12
pH稳定性(pH stability, CIP) 2–13.7
化学稳定性(Chemical stability) 在抗体纯化常用的水相缓冲液中稳定,可耐受0.1–0.5 M NaOH清洗
储存条件(Storage conditions) 20%乙醇,2–8 ℃(储存),2–30 ℃(运输)
供应形式(Supplied as)c 25%(v/v)分散液
有效期(Shelf life) 2年

a:80%以上体积的微球粒径在此范围内。b:结合能力在4 mg/mL h-IgG中孵育30 min测定,不同抗体和使用方法下可能存在差异。c:计量与计价按纯磁珠体积计算,可按需求定制分散液浓度。

订购信息

规格(纯磁珠体积)与货号(Catalog No.) F级粒径(10–40 μm) M级粒径(30–80 μm)
1 mL MX0102F001 MX0102M001
5 mL MX0102F005 MX0102M005
25 mL MX0102F025 MX0102M025
100 mL MX0102F100 MX0102M100
1 L MX0102F901 MX0102M901

表中货号(Catalog No.)对应具体粒径与包装规格,规格按纯磁珠体积计量。如需更大规格或其他规格,请联系销售人员。

抗体结合谱参考

以下完整列出说明书附录中的物种及免疫球蛋白类型,供Protein A、Protein G初步选型参考。具体抗体及Fc融合蛋白需通过小规模实验确认。

物种 类型 / 亚型 Protein A Protein G
人(Human) IgG1 +++ +++
IgG2 +++ +++
IgG3 - +++
IgG4 +++ +++
IgD - -
IgA, IgM variable -
小鼠(Mouse) IgG1 - +++
IgG2a +++ +++
IgG2b +++ +++
IgG3 ++ +++
大鼠(Rat) IgG1 - +
IgG2a - +++
IgG2b - ++
IgG3 - ++
兔(Rabbit) IgG +++ +++
牛(Cow) IgG ++ +++
山羊(Goat) IgG - ++
猪(Pig) IgG +++ +++
狗(Dog) IgG ++ +
鸡(Chicken) IgY - -

−:不结合或微弱结合;+:弱结合;++:中等结合;+++:强结合;variable:结合存在差异。符号不代表本产品实测载量。IgA、IgM、IgD及IgY并非IgG亚型,列出用于适用性参考。

抗体纯化流程

01 平衡
PBS平衡磁珠

使用5–10倍磁珠体积的PBS平衡2–3次(20 mM磷酸钠、150 mM NaCl,pH 7.2–7.4)。

02 结合
样品与磁珠混匀结合

加入样品,室温混匀孵育30–60 min,保持磁珠均匀悬浮;建议上样量为最大结合能力的50–80%。

03 洗涤
磁分离后洗涤并弃去洗液

磁分离后,用5–10倍磁珠体积的结合/洗涤缓冲液洗涤2–3次。

04 洗脱
磁分离后将洗脱液转移到新收集管

用2–5倍磁珠体积的0.1 M甘氨酸或柠檬酸盐(pH 3.5–4.0)洗脱;如需孵育,控制在5–10 min。

05 中和
在独立收集管中中和洗脱液

可在收集管中预加洗脱液体积10–20%的1 M Tris-HCl(pH 8.0–9.0);低pH敏感抗体应立即中和。

以上为操作概览,完整条件请参照使用说明书。推荐料液/纯磁珠体积比为15:1至50:1。可重复洗脱1–3次,并合并浓度符合要求的洗脱液;如需减小体积,可每次用0.5–2倍磁珠体积洗脱3–6次。洗脱后立即用5–10倍磁珠体积的结合/洗涤缓冲液洗涤磁珠2–3次,使其恢复中性。

再生、在位清洗与储存

洗脱后先用结合/洗涤缓冲液将磁珠恢复至中性。建议根据料液洁净程度,每1–5个纯化循环执行一次CIP,或在发现收率下降、纯度降低时执行。

在位清洗方案 目的 操作流程
标准方案 去除沉淀/变性蛋白 用5–10倍磁珠体积的0.1–0.5 M NaOH清洗,接触15–30分钟;立即用5–10倍磁珠体积的结合缓冲液洗涤数次,直至pH恢复中性。

注意:碱性CIP之前,务必先用中性缓冲液(如结合缓冲液)洗涤磁珠,避免酸性洗脱缓冲液与高浓度碱液直接接触产生放热反应。

长期储存:用20%乙醇洗涤2–3次后,重悬于20%乙醇中,2–8 ℃保存。严禁冷冻。

常见问题

如何计算磁珠用量?

按纯磁珠体积计算。25%(v/v)分散液使用前需充分混匀,分散液取用量为所需纯磁珠体积的4倍,例如1 mL纯磁珠对应4 mL分散液。

回收率偏低时如何排查?

检查上样量、孵育时间、混合状态及磁珠损失。建议上样量控制在最大结合能力的50–80%。若洗脱不充分,可按说明书筛选更低pH的洗脱条件(如pH 2.8–3.0);低pH敏感抗体应立即中和。

是否可以使用NaOH清洗?

可以。用5–10倍磁珠体积的0.1–0.5 M NaOH清洗,接触15–30分钟后立即用结合缓冲液洗涤数次,直至pH恢复中性。碱性CIP前务必先用中性缓冲液洗涤磁珠。

如何清洗与保存?

根据料液洁净程度,每1–5个纯化循环执行一次CIP,或在收率下降、纯度降低时执行。长期储存前用20%乙醇洗涤2–3次,再重悬于20%乙醇中,2–8 ℃保存,严禁冷冻,避免磁珠完全干燥。

首次使用时配基泄漏较高怎么办?

按说明书建议,在首次纯化前对新磁珠进行一次完整的空白运行,包括CIP步骤,以洗脱不稳定的配基。

纯度偏低或磁分离效率低时怎么办?

纯度偏低时可增加洗涤次数或体积,并加强洗涤时的混合以释放被包埋的杂质。样品黏度过高时可适当稀释;使用与容器匹配的磁力架,必要时更换较大容器或分批处理。

技术、价格咨询 / 索取说明书

请提供抗体物种与亚型、样品体积和操作设备,便于我们协助选择型号与规格。

邮箱:moxi@moxibiotech.com 电话:18106521300

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