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PG AT MoxiBeads耐碱蛋白G琼脂糖磁珠

ALKALI-TOLERANT PROTEIN G MAGNETIC AGAROSE BEADS

PG AT MoxiBeads®
耐碱蛋白G琼脂糖磁珠

用于多种哺乳动物IgG及含Fc片段融合蛋白的捕获与纯化。采用超顺磁性琼脂糖凝胶微球与耐碱重组蛋白G配基,适用于细胞培养上清、血清、腹水等样品,支持0.1 M NaOH在位清洗(CIP)。

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产品特点

重组耐碱配基 Protein G由大肠杆菌表达,已去除白蛋白结合域;配基定向偶联,保持高载量与高活性;经工程改造增强耐碱性能,可用0.1 M NaOH清洗。

超顺磁琼脂糖基质 采用约4 μm的超顺磁磁核,一个或数个磁核被多孔琼脂糖包埋,形成磁性琼脂糖微球。磁响应速度快、无剩磁。

适配不同处理规模 兼容移液模式和磁棒模式;F级粒径(10–40 μm)适用于小规模、高通量纯化,收率更高;M级粒径(30–80 μm)磁响应更快,适配不同规模的手动磁分离器和自动化磁分离纯化设备,支持工业级放大生产。

技术参数

产品名称(Product name) PG AT MoxiBeads F PG AT MoxiBeads M
产品编号(Product code) MX0107F MX0107M
基质(Matrix) 超顺磁性琼脂糖凝胶微球
配基(Ligand) 重组蛋白G,源自大肠杆菌(E. coli),≥6 mg/mL
粒径范围(Particle size)a 10–40 μm 30–80 μm
结合能力(Binding capacity)b ≥40 mg h-IgG/mL纯磁珠
pH稳定性(pH stability) 操作pH范围:3–10;在位清洗耐受pH:2–13
化学稳定性(Chemical stability) 耐受0.1 M NaOH、常用抗体纯化水相缓冲液,以及6 M盐酸胍(pH 4.7)、70%乙醇等常用再生清洗试剂
储存条件(Storage conditions) 20%乙醇,2–8 ℃(储存),2–30 ℃(运输)
供应形式(Supplied as)c 25%(v/v)分散液
有效期(Shelf life) 2年

a:80%以上体积的微球粒径在此范围内,也可定制粗粒径C(50–150 μm)的产品。b:结合能力在4 mg/mL h-IgG中孵育30 min测定,不同抗体和使用方法下可能存在差异;该指标不等同于动态结合载量。c:计量与计价按纯磁珠体积计算,可按需求定制分散液浓度。

订购信息

规格(纯磁珠体积)与货号(Catalog No.)

F级粒径(10–40 μm)

M级粒径(30–80 μm)

1 mL MX0107F001 MX0107M001
5 mL MX0107F005 MX0107M005
25 mL MX0107F025 MX0107M025
100 mL MX0107F100 MX0107M100
1 L MX0107F901 MX0107M901

表中货号(Catalog No.)对应具体粒径与包装规格,规格按纯磁珠体积计量。如需更大规格、其他规格或分散液浓度,请联系销售人员。

抗体结合谱参考

以下完整列出说明书附录中的物种及免疫球蛋白类型,供Protein A、Protein G初步选型参考。具体抗体及Fc融合蛋白需通过小规模实验确认。

物种 类型 / 亚型 Protein A Protein G
人(Human) IgG1 +++ +++
IgG2 +++ +++
IgG3 - +++
IgG4 +++ +++
IgD - -
IgA, IgM variable -
小鼠(Mouse) IgG1 - +++
IgG2a +++ +++
IgG2b +++ +++
IgG3 ++ +++
大鼠(Rat) IgG1 - +
IgG2a - +++
IgG2b - ++
IgG3 - ++
兔(Rabbit) IgG +++ +++
牛(Cow) IgG ++ +++
山羊(Goat) IgG - ++
猪(Pig) IgG +++ +++
狗(Dog) IgG ++ +
鸡(Chicken) IgY - -

−:不结合或微弱结合;+:弱结合;++:中等结合;+++:强结合;variable:结合存在差异。符号不代表本产品实测载量。IgA、IgM、IgD及IgY并非IgG亚型,列出用于适用性参考。

抗体纯化流程

01 平衡
PBS平衡磁珠

用5–10倍磁珠体积的PBS平衡2–3次(20 mM磷酸钠、150 mM NaCl,pH 7.2–7.4)。

02 结合
样品与磁珠混匀结合

加入样品,室温混匀孵育30–60 min;上样量建议为最大结合能力的50–80%。

03 洗涤
磁分离后洗涤并弃去洗液

磁分离后,用5–10倍磁珠体积的PBS洗涤2–3次。

04 洗脱
磁分离后将洗脱液转移到新收集管

加入2–5倍磁珠体积的0.1 M甘氨酸(pH 3.0),温和混匀3–5 min后磁分离、收集上清。

05 中和
在独立收集管中中和洗脱液

收集管中预加洗脱液体积10–20%的1 M Tris-HCl(pH 8.0–9.0),使洗脱产物立即中和。

以上为操作概览,完整条件请参照使用说明书。低pH洗脱为短时操作,结束后应立即将磁珠恢复至中性环境。

再生、在位清洗与储存

建议根据料液洁净程度,每1–5个纯化循环执行一次CIP,或在收率下降、纯度降低时执行。

目的 清洗液 操作条件
去除沉淀/变性蛋白 0.1 M NaOH 用5–10倍磁珠体积清洗,接触5–15 min;立即用5–10倍磁珠体积的结合缓冲液洗涤数次,直至pH恢复中性。
去除疏水性蛋白杂质 70%乙醇或0.1%非离子表面活性剂 用5–10倍磁珠体积清洗;随后用结合缓冲液洗涤2–3次。

长期储存:用20%乙醇洗涤2–3次,重悬于20%乙醇中,于2–8 ℃保存,严禁冷冻。耐碱性不代表可任意提高NaOH浓度或延长接触时间。

常见问题

如何计算磁珠用量?

按纯磁珠体积计算。25%分散液使用前需充分混匀,分散液取用量为所需纯磁珠体积的4倍。

回收率偏低时如何排查?

检查上样量、孵育时间、混合状态及洗脱pH,留意操作中的磁珠损失。说明书建议上样量控制在最大结合能力的50–80%,低pH敏感抗体应及时中和。

是否可以使用NaOH清洗?

可以。本品为耐碱蛋白G版本,说明书推荐用5–10倍磁珠体积的0.1 M NaOH清洗,接触5–15分钟后立即用结合缓冲液洗涤数次,直至pH恢复中性。请按规定浓度和接触时间操作。

如何清洗与保存?

去除沉淀/变性蛋白可采用0.1 M NaOH;去除疏水性蛋白杂质可采用70%乙醇或0.1%非离子表面活性剂,具体流程见上方CIP方案。长期储存前用20%乙醇洗涤2–3次,再重悬于20%乙醇中,2–8 ℃保存,严禁冷冻,避免磁珠完全干燥。

选型咨询与资料索取

技术、价格咨询 / 索取说明书

请提供抗体物种与亚型、样品体积和操作设备,便于我们协助选择型号与规格。

邮箱:moxi@moxibiotech.com 电话:18106521300

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